小麦矮腥黑粉菌侵染小麦子房的激光共聚焦显微观察方法

本试验利用碘化丙啶(propidium iodide)和Alexa Flour 488(AF 488)标记的麦胚凝集素(WGA)分别对小麦子房细胞和小麦矮腥黑粉菌进行染色,结合激光共聚焦显微镜成像系统获取小麦子房的三维立体图像。该技术可获得清晰的小麦子房细胞图像,并观察小麦矮腥黑粉菌在小麦子房中的侵染状况。该方法将为研究病原菌在寄主体内的分布提供可参考依据。     

水稻温敏型叶片白化转绿突变体tsa2的表型鉴定与基因定位

水稻温敏型叶色突变体是研究植物光合作用、叶绿体结构和功能以及温度影响叶绿体发育的理想材料。利用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变籼型水稻(OryzasativaL.)三系保持系西农1B,从其后代中筛选到一个突变性状稳定遗传的温敏型叶片白化转绿突变体tsa2 (temperature-sensitive green-revertible albino 2)。与野生型相比, tsa2突变表型受温度影响, 22°C条件下萌发的野生型幼苗表型正常,而tsa2幼苗完全白化,且约40%白化苗死亡,存活白化苗的光合色素含量、光合速率均显著降低,成熟期主要农艺性状均显著变劣;在28°C下萌发的tsa2幼苗叶片呈浅绿色并伴有白条纹,其光合色素含量显著降低,光合速率及主要农艺性状差异较小; 32°C下萌发的tsa2幼苗叶片无明显差异。透射电镜观察显示,与野生型相比,tsa2在22°C下叶肉细胞中无叶绿体或存在异常发育叶绿体(尚未分化出基粒和基层),在28°C下部分叶肉细胞含少量发育完整的叶绿体,在32°C下叶肉细胞数量及形态均正常。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,与野生型相比,tsa2突变体中部分光合色素代谢途径基因、叶绿体发育相关基因及光合作用相关基因的表达水平呈不同程度变化。遗传分析表明, tsa2突变表型受一对隐性核基因控制, TSA2被定位于第5染色体SSR标记S5-57和S5-119之间,物理距离为718 kb。本研究为水稻遗传改良及研究温度影响叶绿体发育机制奠定了基础。     

小麦芒长抑制基因B2的精细定位与候选基因分析

芒是小麦重要的穗部器官和形态特征,是小麦长期进化和适应环境的结果,对产量和抗旱性等具有重要影响。目前,对麦芒的遗传与发育还缺乏系统的研究,相关基因克隆或精细定位的研究尚未见报道。本试验利用短芒材料‘六柱头’与长芒材料‘石矮1号’构建的F2群体(SL-F2)对芒的遗传与发育进行了研究。细胞学观察表明,短芒主要是由细胞长度变短引起;遗传分析表明,‘六柱头’的短芒由显性单基因控制;借助Wheat660K SNP芯片的BSA分析和SL-F2群体的精细定位,确定‘六柱头’的芒长抑制基因是前人报道的B2位点,并将其定位到6B染色体4.84Mb的物理区间(471.28～476.12 Mb)内,该区段在中国春与矮抗58间具有良好的共线性。在B2定位区间共有61个基因,其中5个在中国春穗部特异表达,TraesCS6B02G264400在中国春和Azhurnaya幼穗表达差异显著。这些研究结果为B2基因的克隆、小麦芒形成机理的解析及育种中的应用奠定了基础。     

一个CRISPR/Cas9-VQR基因编辑系统的构建

CRISPR/Cas9系统是一种广泛应用于细菌、酵母、动物和植物中的基因组定点编辑技术,但该编辑系统的使用范围受PAM (proto-spacer-motif)位点NGG的限制。本研究通过突变Streptococcus pyogenes Cas9 (SpCas9)编码氨基酸(1135位的天冬氨酸D突变成缬氨酸V, 1335位的精氨酸R突变为谷胱氨酸Q, 1337位的苏氨酸T突变为精氨酸R,命名该突变子为Cas9-VQR)改造其识别PAM为NGA的位点以扩大其使用范围。并使用玉米Ubi启动子启动Cas9-VQR基因、优化SpCas9的密码子、加入保守的核定位信号序列、增加单子叶植物中保守的3′UTR序列和使用水稻U6启动子启动gRNA来修饰该编辑系统。结果表明Cas9-VQR系统能够识别PAM为NGA的位点,并进行有效的切割。体外酶切活性检测结果表明Cas9-VQR的切割效率为5%～70%。水稻转化检测结果表明Cas9-VQR的切割效率约为27.5%～70.5%,平均切割效率为46.23%。本研究拓宽了CRISPR/Cas9系统在作物中的使用范围,特别是NGA PAM位点较高的作物。     

Study on the Hepatoprotective Effect of Oxalis coriniculata L. and Related Mechanism by Regulating Oxidative Stress and TLR-2/NF-κB Signaling Pathway

[Objectives]This study aimed to explore the protective effect of Oxalis coriniculata L.on rats with acute liver injury induced by carbon tetrachloride(CCl4)and ...     

EMS诱变NC 55突变体库的创建及高钾突变材料的筛选

为了获得不同类型的烟草突变体库,用0.6%的EMS诱变处理NC 55,对诱变后的M 1代的大田性状进行调查分析,并从中筛选高钾突变材料。EMSNC 55 M 1代植物学性状和农艺性状变异类型丰富,突变率为11.88%,主要为多头突变、株型突变、叶片突变等;通过大田筛选和烟叶化验,筛选到钾含量高于对照NC 55的突变材料74份,其中钾含量超过1.50%的35份,以EMSNC 55-5501烟叶钾含量最高,为2.03%。EMSNC 55 M 1代单株留种606份,为进一步筛选各种类型突变体和选育新品种创建了很好的突变体库。     

重庆市20例经鼻高流量氧疗治疗重型新型冠状病毒肺炎的疗效分析

为评价经鼻高流量氧疗(high-flow nasal cannula oxygen therapy, HFNC)治疗重型新型冠状病毒肺炎(novel coronavirus pneumonia, NCP)的临床疗效,对重庆市公共卫生医疗救治中心2020年1月24日-2月23日收治的20例接受HFNC治疗的重型NCP患者临床资料进行了回顾性分析.结果表明:经HFNC治疗后, 7例(35%)患者症状及氧合指数(oxygenation index,用P/F表示)改善,继续HFNC治疗; 13例患者(65%)经治疗后症状无改善或出现加重或恶化,改为无创通气(noninvasive ventilation, NIV)或有创机械通气(invasive mechanical ventilation, IMV).两组患者在性别、年龄、基础疾病等一般资料方面差异无统计学意义(p0.05),但HFNC治疗失败组平均年龄高于HFNC治疗成功组(分别为63.30岁和57.76岁).对HFNC治疗进行失败风险的单因素分析发现,治疗成功及失败患者的初始呼吸频率、 CD4+绝对值、P/F、治疗前ROX指数(rate-oxygenation index)、 12 h ROX指数比较差异无统计学意义(p0.05),但治疗成功者基线SaO_2、治疗后2 h ROX指数和治疗后12 h ROX指数显著升高(p0.05).对单因素分子中p0.05的因素及基线P/F用Cox风险比例模型进行分析发现,基线SaO_2、基线P/F和治疗后2 h、治疗后12 h的ROX指数均不是HFNC治疗失败的独立危险因素,但它们的值越低, HFNC治疗失败的风险就越大.基线P/F200 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)时, HFNC治疗失败的风险高于P/F≥200 mmHg者. HFNC可用于治疗基线P/F≥200 mmHg的重型NCP患者,而基线P/F200 mmHg或年龄≥50岁的患者,治疗失败的风险较大.     

"沃得天"微肥叶面喷施对猕猴桃产量和品质的影响

验证"沃得天"微肥(一种新型微量元素水溶肥)对猕猴桃果树的喷施肥效,为陕西省猕猴桃生产提质增效提供科学依据。试验设置了喷施新型微量元素水溶肥("沃得天"微肥1(W1)、"沃得天"微肥2(W2))、普通微量元素水溶肥(G1)、清水(当地地下水,CK1)4个处理,供试材料为"秦美"猕猴桃,田间采用完全随机区组设计,测定了叶片生长、果实产量和品质方面的指标,并综合评价了"沃得天"微肥的田间应用效果。结果表明,与对照相比,喷施W1和W2均显著提高了猕猴桃叶片的百叶重和百叶厚,百叶重分别增加22.6%和33.3%,百叶厚分别增加20%和27%;其中W2还能同时增加果实横、纵径,增幅为11.0%和12.9%,并能够显著提高叶片中Cu、Zn、Fe、Mn以及Ca的含量,其中与普通微肥相比增加Fe元素60～78 mg·kg~(-1)。喷施W1和W2分别增加猕猴桃单果重为11.3%和8.8%,增加了果实的固酸比,其中W2果实中Vc的含量显著增加了8.6%;W1和W2还不同程度增加了果实中多种微量元素和钙的含量,优化了猕猴桃果实外观和营养品质。另外,W1和W2处理猕猴桃分别增产8.11%和5.17%,增益8.83%和5.43%,而且2种"沃得天"新型微量元素肥料对猕猴桃增产提质效果均优于市售普通微肥。因此,叶面喷施"沃得天"新型微肥可以促进陕西"秦美"猕猴桃的生长发育,并且能在一定程度上调控叶片和果实对必需微量元素的累积,在提高果实品质和增产增收及优化猕猴桃肥料管理方面效果显著。     

Astrocyte activity and autophagy after radiation-induced brain injury in rats

AIM: To investigate the activity of astrocytes and autophagy-related changes after radiation-induced brain injury (RBI) in rats.METHODS: A total of 36 Sprague-Dawley rats, weighing 180~200 g, were trained for 4 d in the Morris water maze. They were randomly divided into sham group, model group and 3-methyladenine (3-MA) group. The rats in model group and 3-MA group were given single whole-brain X-ray irradiation at a dose of 20 Gy after intraperitoneal anesthesia. After the irradiation was completed, the rats in model group was given 5 μL of NaCl into the lateral ventricle, and the rats in 3-MA group was injected with 3-MA at 600 nmol into the lateral ventricle. After 8 weeks of feeding, Morris water maze was used for measuring the learning and memory abilities. The brain tissues were taken and HE staining was used to observe the pathological changes of the hippocampus. The protein level of GFAP was determined by immunohistochemistry and Western blot for evaluating astrocyte activity. Dual fluorescence staining of GFAP and LC3 was performed for evaluating the changes of autophagy in the astrocytes. The protein level of cleaved caspase-3 detected by Western blot and TUNEL staining in the ipsilateral hippocampus were used to evaluate the apoptosis. The contents of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) were examined by ELISA to assess the inflammatory response in the hippocampus.RESULTS: Radiation inhibited astrocyte activity, activated autophagy in astrocytes, and aggravated brain damage. 3-MA promoted the activation of astrocytes and promoted the repair of brain tissue damage.CONCLUSION: The injury of rat hippocampus after radiation is obvious, and the number of astrocytes is significantly reduced. 3-MA significantly attenuates the damage. This finding may provide a new approach for the treatment of radiation-induced brain injury.